Дослідження рівня котиніна у сечі також має прогностичне значення. Рівень котиніна в сечі вище 1,000 нг/мл свідчить про високий рівень нікотинової залежності (чутливість 714%, специфічність 744%).
Для визначення нікотину та його метаболітів у сечі можуть бути використані різні методи: газова хроматографія/мас-спектрометрія (ГХ/МС), рідинна хроматографія/мас спектрометрія (РХ/МС), радіоімунний аналіз, імуноферментний аналіз та інші.
За добу та протягом усього періоду збору слини виключити вживання кофеїну, алкоголю, фізичних навантажень. Не курити протягом 1 години до збирання слини.