Нікотин та його метаболіти можуть бути досліджені в крові, слині, сечі, а також придатках шкіри (волосся та нігті). Дослідження сечі є найбільш зручним способом, так як це неінвазивний аналіз, який не поступається за інформативністю аналізу крові.
Визначення засноване на принципі конкурентного імунохроматографічного аналізу, при якому котинін, що знаходиться в аналізованому зразку, конкурує з котинином, іммобілізованим на мембрані смужки, за можливість зв'язування зі специфічними моноклональними антитілами до котиніна, кон'югованими з колоїдним …
За добу та протягом усього періоду збору слини виключити вживання кофеїну, алкоголю, фізичних навантажень. Не курити протягом 1 години до збирання слини.
Для визначення нікотину та його метаболітів у сечі можуть бути використані різні методи: газова хроматографія/мас-спектрометрія (ГХ/МС), рідинна хроматографія/мас спектрометрія (РХ/МС), радіоімунний аналіз, імуноферментний аналіз та інші.